• 1. 中南大学湘雅二医院 急诊科(长沙 410011);
  • 2. 中南大学湘雅二医院 神经内科(长沙 410011);
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目的 阐明多囊肾病基因 1(PKD1)基因对小鼠主动脉平滑肌细胞自噬的影响。方法 构建 PKD1 基因的 shRNA 慢病毒干扰及 PKD1 基因促进剂 ETS-1 慢病毒过表达载体,转染小鼠主动脉平滑肌细胞,采用实时荧光定量核酸扩增(qPCR)检验干扰及过表达效率。同时通过 qPCR 及 Western blotting 检测对照组、shPKD1 组及 ETS-1 组小鼠主动脉平滑肌细胞自噬标志分子 Atg5、Beclin1 和 LC3 的表达水平。结果 与正常对照组相比,shPKD1 组 PKD1 mRNA 表达量下降(P<0.05),而 ETS-1 组 ETS-1 mRNA 及 PKD1 mRNA 表达量明显升高(P<0.05)。shPKD1 组与对照组相比,自噬标志物 Atg5 和 Beclin1 mRNA 表达水平明显降低(P<0.05);ETS-1 组与对照组相比,Atg5 和 Beclin1 mRNA 表达水平明显升高(P<0.001)。shPKD1 组与对照组相比,Atg5、Beclin1 和 LC3 蛋白表达水平明显降低(P<0.05);ETS-1 组与对照组相比,Atg5、Beclin1 和 LC3 蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论 PKD1 基因的表达能够影响小鼠主动脉平滑肌细胞自噬,即:PKD1 基因表达下调可抑制主动脉平滑肌细胞自噬,而 PKD1 基因过表达能够促进小鼠主动脉平滑肌细胞自噬。